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异银杏素改善斑马鱼行为障碍和神经细胞损伤的机制研究
Mechanism of isoginkgetin in improving zebrafish behavioral disorders and neuronal injury
- 上海中医药杂志 2026年60卷第2期 页码：68-76
- 作者机构：
1.上海中医药大学（上海 201203）
2.杭州医学院（浙江 杭州 310059）
3.上海市药材有限公司（上海 200082）
4.上海上药杏灵科技药业股份有限公司（上海 201703）
- 作者简介：
刘新娟，女，博士研究生，主要从事中医药对脑疾病的机制研究工作
王星禹，实验师；E-mail：wang215103@163.com.
徐颖，教授，博士研究生导师；E-mail：yingxu612@shutcm.edu.cn
- 基金信息：国家自然科学基金面上项目(82174003);上海市教委产教融合项目(2022310031002310)
DOI：10.16305/j.1007-1334.2026.z20250409006
中图分类号：收稿：2025-04-09，
纸质出版：2026-02-10
- 稿件说明：
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刘新娟,俞婷,刘妍佳,等.异银杏素改善斑马鱼行为障碍和神经细胞损伤的机制研究[J].上海中医药杂志,2026,60(2):68-76.
LIU Xinjuan,YU Ting,LIU Yanjia,et al.Mechanism of isoginkgetin in improving zebrafish behavioral disorders and neuronal injury[J].Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine,2026,60(2):68-76.
刘新娟,俞婷,刘妍佳,等.异银杏素改善斑马鱼行为障碍和神经细胞损伤的机制研究[J].上海中医药杂志,2026,60(2):68-76. DOI： 10.16305/j.1007-1334.2026.z20250409006.
LIU Xinjuan,YU Ting,LIU Yanjia,et al.Mechanism of isoginkgetin in improving zebrafish behavioral disorders and neuronal injury[J].Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine,2026,60(2):68-76. DOI： 10.16305/j.1007-1334.2026.z20250409006.
摘要
目的
2
探究异银杏素（ISO）通过调控APP裂解酶与微管相关蛋白tau（Tau）蛋白激酶对氯化铝（AlCl
3
）诱导斑马鱼行为障碍及β淀粉样蛋白1-42片段（Aβ
1-42
）诱导PC12细胞损伤的影响。
方法
2
①分子对接预测ISO与APP裂解酶β-分泌酶1（BACE1）、早老素1（PS1）、早老素2（PS2）和Tau蛋白激酶糖原合成激酶3β（GSK3β）、细胞周期蛋白依赖性激酶5（CDK5）的结合能。②以受精后3天（3 pdf）的斑马鱼为研究对象，分为对照（Ctrl）组、模型（AlCl
3
）组、ISO低、中、高剂量（2、8、16 μg/mL）组及多奈哌齐（DPZ）组（
n
=30），浸染给药24 h，行为轨迹跟踪系统检测斑马鱼在明暗刺激下的行为反应。③应用实时逆转录PCR（RT-qPCR）技术检测各组斑马鱼的
BACE1
、
PS1
、
PS2
、
CDK5
和
GSK3β
mRNA水平。④以PC12细胞为研究对象，应用10 μmol/L Aβ
1-42
诱导损伤模型，2.5 μmol/L ISO处理24 h，具体分组为对照（Ctrl）组、对照加药（Ctrl+ISO）组、模型（Aβ
1-42
）组、模型加药（Aβ
1-42
+ISO）组，应用RT-qPCR和Western blot检测细胞中
BACE1
、
PS1
、
PS2
、
CDK5
、
GSK3β
mRNA和蛋白水平，并检测丝氨酸396位点磷酸化Tau蛋白［p-Tau（396）］的表达水平。⑤以10 μmol/L氯化锂（LiCl）为对照，检测ISO和LiCl单独或联合给药对Aβ
1-42
诱导PC12细胞GSK3β和p-Tau（396）蛋白表达的影响。
结果
2
①ISO与各因子均有较低的结合能。②与AlCl
3
组相比，低、中、高剂量ISO与DPZ均能提高AlCl
3
组斑马鱼的运动速度。③RT-qPCR结果显示，ISO显著抑制
BACE1
、
PS1
、
PS2
、
CDK5
、
GSK3β
mRNA水平（
P
<
0.05）。④PC12细胞实验中，与Aβ
1-42
组相比，2.5 μmol/L ISO显著降低BACE1、PS1、PS2、CDK5、GSK3β的蛋白和mRNA水平（
P
<
0.05），并降低p-Tau（396）的水平（
P
<
0.05）。⑤Western blot结果表明，与Aβ组相比，ISO与LiCl单独或者联合给药均能显著抑制GSKβ和p-Tau的蛋白水平（
P
<
0.05），且各给药组间没有明显差异（
P
>
0.05）。
结论
2
ISO通过抑制Aβ裂解酶和Tau蛋白激酶水平共同发挥神经保护作用。
Abstract
Objective
2
To investigate the effects of isoginkgetin （ISO） on AlCl
3
-induced zebrafish behavioral disorders and Aβ
1-42
-induced PC12 cell injury， through the regulation of APP cleaving enzymes and microtubule-associated protein Tau kinases.
Methods
2
① Molecular docking was used to predict the binding energies of ISO with APP cleaving enzymes， including β‑secretase 1 （BACE1）， presenilin 1 （PS1）， presenilin 2 （PS2）， glycogen synthase kinase 3β （GSK3β） and cyclin-dependent kinase 5 （CDK5）. ②Zebrafish at 3 days post-fertilization （3 dpf） were used as the subjects of the study and divided into the following groups： control （Ctrl）， model （AlCl
3
）， ISO low， medium and high doses （2， 8， 16 μg/mL）， and donepezil （DPZ） groups （
n
=30）. The zebrafish were exposed to the treatment for 24 hours， and behavioral responses to light/dark stimulation were monitored using a behavioral tracking system. ③Real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction （RT-qPCR） was used to measure mRNA levels of
BACE1
，
PS1
，
PS2
，
CDK5
， and
GSK3β
in zebrafish. ④ PC12 cells were treated with 10 μmol/L Aβ
1-42
to induce a injury model. Cells were treated with 2.5 μmol/L ISO for 24 hours. The groups were： Ctrl， Ctrl+ISO， Aβ
1-42
， and Aβ
1-42
+ISO groups. RT-qPCR and Western blot were used to measure the mRNA and protein levels of
BACE1
，
PS1
，
PS2
，
CDK5
，
GSK3β
， and to assess the protein levels of p-Tau （396）. ⑤ The effects of ISO and LiCl， either alone or in combination， on the protein expression of GSK3β and p‑Tau （396） in Aβ
1-42
-induced PC12 cells were assessed， using 10 μmol/L lithium chloride （LiCl） as a control.
Results
2
①ISO had relatively low binding energies with all target factors. ②ISO （low， medium， and high doses） and DPZ significantly increased the movement speed of zebrafish in the AlCl
3
group. ③RT-qPCR results showed that ISO significantly reduced the mRNA levels of
BACE1
，
PS1
，
PS2
，
CDK5
， and
GSK3β
（
P
<
0.05）. ④In PC12 cells， compared to the Aβ
1-42
group， 2.5 μmol/L ISO significantly reduced the protein and mRNA levels of BACE1， PS1， PS2， CDK5， and GSK3β （
P
<
0.05）， and decreased the level of p-Tau （396） （
P
<
0.05）. ⑤Western blot results showed that ISO and LiCl， whether administered alone or in combination， significantly inhibited the protein levels of GSK3β and p-Tau （
P
<
0.05）， with no significant differences observed among the treatment groups （
P
>
0.05）.
Conclusion
2
ISO exerts neuroprotective effects by inhibiting the levels of Aβ cleaving enzymes and Tau phosphokinases.
关键词
Keywords
references
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