Mechanistic study on regulation of wide‑interacting nude‑associated matrix‑associated region 2 by 5<italic style="font-style: italic">R</italic>‑5‑hydroxytriptolide （LLDT‑8） in collagen‑induced arthritis mice

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Mechanistic study on regulation of wide‑interacting nude‑associated matrix‑associated region 2 by 5R‑5‑hydroxytriptolide （LLDT‑8） in collagen‑induced arthritis mice

更新时间：2026-02-09

- Mechanistic study on regulation of wide‑interacting nude‑associated matrix‑associated region 2 by 5R‑5‑hydroxytriptolide （LLDT‑8） in collagen‑induced arthritis mice
- Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine Vol. 60, Issue 2, Pages: 58-67(2026)
- 作者机构：
  
  1.上海中医药大学附属光华医院风湿科（上海 200052）
  2.复旦大学附属华山医院风湿免疫科（上海 200040）
  3.上海交通大学医学院附属同仁医院康复科（上海 200336）
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16305/j.1007-1334.2026.z20241029004
  CLC：
- Received：29 October 2024，
  
  Published：10 February 2026
- 稿件说明：
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许林帅,金晔华,朱小霞,等.雷藤舒调控滑膜关节相关长链非编码RNA2在胶原诱导性关节炎小鼠中的作用机制研究[J].上海中医药杂志,2026,60(2):58-67.

XU Linshuai,JIN Yehua,ZHU Xiaoxia,et al.Mechanistic study on regulation of wide‑interacting nude‑associated matrix‑associated region 2 by 5R‑5‑hydroxytriptolide （LLDT‑8） in collagen‑induced arthritis mice[J].Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine,2026,60(2):58-67.
许林帅,金晔华,朱小霞,等.雷藤舒调控滑膜关节相关长链非编码RNA2在胶原诱导性关节炎小鼠中的作用机制研究[J].上海中医药杂志,2026,60(2):58-67. DOI： 10.16305/j.1007-1334.2026.z20241029004.

XU Linshuai,JIN Yehua,ZHU Xiaoxia,et al.Mechanistic study on regulation of wide‑interacting nude‑associated matrix‑associated region 2 by 5R‑5‑hydroxytriptolide （LLDT‑8） in collagen‑induced arthritis mice[J].Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine,2026,60(2):58-67. DOI： 10.16305/j.1007-1334.2026.z20241029004.

摘要

目的

2

探讨滑膜关节相关长链非编码RNA2（WAKMAR2）对胶原诱导性关节炎（CIA）小鼠滑膜炎症的影响及雷藤舒（T8）的干预作用机制。

方法

2

将小鼠随机分为正常组（WT组）、CIA模型组（CIA组）、过表达空载体组（CIA-NC组）、过表达慢病毒组（CIA-LV组）、T8给药组（CIA+T8组）、过表达空载体后的T8给药组（CIA-NC+T8组）、过表达慢病毒后的T8给药组（CIA-LV+T8组），每组8只。除正常组外，其余组构建小鼠CIA模型，并在CIA-LV组、CIA-LV+T8组小鼠膝关节腔注射WAKMAR2过表达慢病毒，连续注射3周，每周注射1次；CIA组只进行羟丙基甲基纤维素（HPMC）灌胃；CIA+T8组、CIA-NC+T8组、CIA-LV+T8组均进行T8灌胃，灌胃自第28天开始，为期4周。通过活体成像确定病毒转染效率；通过酶联免疫吸附分析（ELISA）检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1（IL‑1）、白细胞介素-6（IL-6）的含量；使用小动物计算机体层显像仪（Micro-CT）观察小鼠足爪关节的骨破坏程度；通过实时逆转录PCR检测滑膜关节WAKMAR2和微小RNA-4478（miR-4478）的表达；通过Western blot检测E2F转录因子1（E2F1）和p53蛋白的表达。

结果

2

①活体成像结果显示WAKMAR2过表达慢病毒注射后在小鼠膝关节部位高表达；②与CIA组和CIA-NC组相比，CIA-LV组小鼠的一般情况及关节炎症指数明显改善，血清中TNF-α、IL-1、IL-6的表达明显降低，WAKMAR2 mRNA表达升高，miR-4478 mRNA表达降低，E2F1和p53的蛋白表达均明显升高；③与CIA+T8组和CIA-NC+T8组相比，CIA-LV+T8组的关节炎炎症指数明显改善，血清中TNF-α、IL-1、IL-6的表达明显降低，WAKMAR2 mRNA表达升高，miR-4478 mRNA表达降低，E2F1和p53的蛋白表达均明显升高。

结论

2

过表达WAKMAR2可改善CIA小鼠关节滑膜炎症微环境，可作为治疗类风湿关节炎（RA）的潜在靶点。T8可通过调控WAKMAR2/miR-4478/E2F1/p53轴降低CIA小鼠的炎症水平。该结果为RA的治疗策略提供了新的研究方向，并为T8的临床应用奠定了理论基础。

Abstract

Objective

2

This study investigates the effect of wide-interacting nude-associated matrix-associated region 2 （WAKMAR2） on synovial inflammation and bone destruction in collagen-induced arthritis （CIA） mice， as well as the mechanism of intervention by 5

R

-5-hydroxytriptolide （LLDT-8， T8）.

Methods

2

The mice were randomly divided into the normal group （WT group）， the CIA model group （CIA group）， the overexpression empty vector group （CIA-NC group）， the overexpression lentivirus group （CIA-LV group）， the T8 administration group （CIA+T8 group）， the T8 administration group after overexpression empty vector （CIA-NC+T8 group）， and the T8 administration group after overexpression lentivirus （CIA-LV+T8 groups）， 8 in each group. Except for the normal group， the CIA models of mice were constructed in the other groups， and WAKMAR2-overexpressing lentivirus was injected into the knee joint cavity of mice in CIA-LV group and CIA-LV+T8 group. The virus was injected continuously for 3 weeks， once a week. The CIA group only received intragastric administration of hydroxypropyl methylcellulose （HPMC）. The CIA+T8 group， the CIA-NC+T8 group and the CIA-LV+T8 group all received T8 gavage. The gavage began on the 28th day and lasted for 4 weeks.

In vivo

imaging was used to determine viral transfection efficiency. The expression of tumor necrosis factor-α （TNF-α）， interleukin-1 （IL-1）， and interleukin-6 （IL-6） in mouse blood was

detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） assay. The degree of joint bone destruction in mouse paws was observed using Micro-CT. Real-time quantitative PCR was used to measure the expression of WAKMAR2

and microRNA-4478 （miR-4478）. Western blot was used to detect the expression of E2F1 and p53 proteins.

Results

2

①

In vivo

imaging demonstrated high expression of WAKMAR2 after lentiviral injection in the knee joints of mice. ②Compared to the CIA group and CIA-NC group， the CIA-LV group showed significant improvement in general condition and arthritis inflammation index， with decreased expression of TNF-α， IL-1， and IL-6 in serum， increased mRNA levels of WAKMAR2， decreased mRNA levels of miR-4478， and elevated protein expression of E2F transcription factor 1 （E2F1） and p53. ③Compared to CIA+T8 group and CIA-NC+T8 group， CIA-LV+T8 group showed significant improvement in general condition and arthritis inflammation index， with decreased expression of TNF-α， IL-1， and IL-6 in serum， increased mRNA levels of WAKMAR2， decreased mRNA levels of miR-4478， and elevated protein expression of E2F1 and p53.

Conclusions

2

Overexpression of WAKMAR2 can improve the synovial inflammation microenvironment in CIA mice and may serve as a potential target for the treatment of rheumatoid arthritis （RA）. T8 can inhibit inflammation levels in CIA mice by regulating the WAKMAR2/miR-4478/E2F1/p53 axis. These findings provide new directions for RA treatment strategies and establish a theoretical foundation for future clinical applications.

关键词

Keywords

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