Exploration on effect and mechanism of fibrinogen overexpression on coronary heart disease with blood stasis syndrome rats based on Nrf2/HO⁃1 signaling pathway

ZHANG Yifan; ZHOU Xiahui; LUO Xiaoxin; ZHOU Manli; ZHAO Yanzhen; JIAN Weixiong

doi:10.16305/j.1007-1334.2025.z20250303003

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Exploration on effect and mechanism of fibrinogen overexpression on coronary heart disease with blood stasis syndrome rats based on Nrf2/HO⁃1 signaling pathway

更新时间：2025-10-17

- Exploration on effect and mechanism of fibrinogen overexpression on coronary heart disease with blood stasis syndrome rats based on Nrf2/HO⁃1 signaling pathway
- Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine Vol. 59, Issue 10, Pages: 72-79(2025)
- 作者机构：
  
  1.湖南中医药大学（湖南长沙 410208）
  2.贵州中医药大学第一附属医院（贵州贵阳 550025）
  3.国家重点学科中医诊断学湖南省重点实验室（湖南长沙 410208）
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.16305/j.1007-1334.2025.z20250303003
  CLC：
- Received：03 March 2025，
  
  Published：10 October 2025
- 稿件说明：
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张宜帆,周霞辉,罗晓欣,等.基于Nrf2/HO⁃1信号通路探究纤维蛋白原过表达对冠心病血瘀证大鼠的影响及机制[J].上海中医药杂志,2025,59(10):72-79.

ZHANG Yifan,ZHOU Xiahui,LUO Xiaoxin,et al.Exploration on effect and mechanism of fibrinogen overexpression on coronary heart disease with blood stasis syndrome rats based on Nrf2/HO⁃1 signaling pathway[J].Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine,2025,59(10):72-79.
张宜帆,周霞辉,罗晓欣,等.基于Nrf2/HO⁃1信号通路探究纤维蛋白原过表达对冠心病血瘀证大鼠的影响及机制[J].上海中医药杂志,2025,59(10):72-79. DOI： 10.16305/j.1007-1334.2025.z20250303003.

ZHANG Yifan,ZHOU Xiahui,LUO Xiaoxin,et al.Exploration on effect and mechanism of fibrinogen overexpression on coronary heart disease with blood stasis syndrome rats based on Nrf2/HO⁃1 signaling pathway[J].Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine,2025,59(10):72-79. DOI： 10.16305/j.1007-1334.2025.z20250303003.

摘要

目的

探讨纤维蛋白原（Fib）过表达对冠心病（CHD）血瘀证大鼠的影响及其通过核红细胞2相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶-1（HO-1）信号通路介导血管内皮损伤的机制。

方法

①将36只大鼠随机分为空白（N）组（6.0 mg/kg 0.9 %氯化钠溶液）、高脂（HFD）组（6.0 mg/kg 0.9 %氯化钠溶液）、高脂+空载体低剂量［HFD

+ 腺病毒相关病毒（AAV）Low］组（8.50×10

vg/kg AAV）、高脂+空载体高剂量（HFD+AAV High）组（1.13×10

vg/kg AAV）、高脂+Fib低剂量（HFD+FIB Low）组［8.50×10

vg/kg纤维蛋白原腺相关病毒载体（AAV-FIB）］、高脂+Fib高剂量（HFD+FIB High）组（1.13×10

vg/kg AAV-FIB）。在高脂喂养的第0天及第3天尾静脉注射给予相应干预，3周后取材。酶联免疫吸附分析（ELISA）法检测Fib表达。②将30只大鼠随机分为空白（N）组（6.0 mg/kg 0.9 %氯化钠溶液）、CHD血瘀证（CHDX）组（6.0 mg/kg 0.9 %氯化钠溶液）、CHD+Fib（CHDX+FIB）组（1.13×10

vg/kg AAV-FIB）。采用高脂饮食联合维生素D

及异丙肾上腺素构建CHD血瘀证大鼠模型，并在高脂喂养的第0天及第3天尾静脉注射给予相应干预。苏木精-伊红（HE）染色评估主动脉的病理形态，并检测血脂、血液流变学指标，ELISA法检测Fib、内皮素-1（ET-1）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平，Western blot法检测Nrf2、HO-1蛋白表达，免疫荧光染色法观察蛋白定位。

结果

①与N组、HFD组比较，HFD+FIB High组Fib表达水平升高（

0.05）。②与N组比较，CHDX组Fib表达水平升高（

0.01），总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平和血浆低切黏度升高（

0.05），主动脉可见明显病变，心电图ST段抬高，MDA、ET-1水平升高（

0.01），SOD水平下降（

0.01），主动脉Nrf2、HO-1蛋白表达水平升高（

0.01）；与CHDX组比较，CHDX+FIB组Fib表达水平进一步升高（

0.05），TC、三酰甘油（TG）和LDL-C水平升高（

0.05），高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平降低（

0.01），血浆黏度升高（

0.05），主动脉形成粥样硬化斑块，心电图ST段抬高

0.1 mV，MDA、ET-1水平下降（

0.01），SOD、Nrf2、HO-1水平升高（

0.01）。

结论

高脂喂养可成功构建Fib过表达大鼠模型，Fib过表达提高了大鼠血脂水平和血浆黏度，从而增加了CHD血瘀证的致病性；同时其通过激活Nrf2/HO-1信号通路启动代偿机制，调节氧化应激引起的血管过度损伤。

Abstract

Objective

To investigate the effects of fibrinogen （Fib） overexpression on rats with coronary heart disease （CHD） with blood stasis syndrome， and the its mechanism in mediating vascular endothelial injury through the nuclear factor erythroid 2-related factor 2 （Nrf2）/heme oxygenase-1 （HO-1） signaling pathway.

Methods

①Thirty-six rats were randomly divided into the control （N） group （6.0 mg/kg 0.9% sodium chloride solution）， high-fat diet （HFD） group （6.0 mg/kg 0.9% sodium chloride

solution）， high-fat+empty vector low-dose ［HFD+adeno-associated virus （AAV） Low］ group （8.50×10

vg/kg AAV）， high-fat+empty vector high-dose （HFD+AAV High） group （1.13×10

vg/kg AAV）， high-fat+Fib low-dose （HFD+FIB Low） group ［8.50×10

vg/kg Fib-associated viral vector （AAV-FIB）］，and high-fat+Fib high-dose （HFD+FIB High） group （1.13×10

vg/kg AAV-FIB）. On day 0 and 3 of high-fat feeding， the rats received the corresponding intervention via tail vein injection， and tissue samples were collected after 3 weeks. Fib expression was detected using enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. ② Thirty rats were randomly divided into the blank （N） group （6.0 mg/kg 0.9% sodium chloride solution）， CHD blood stasis syndrome （CHDX） group （6.0 mg/kg 0.9% sodium chloride solution）， CHD+Fib （CHDX+FIB） group （1.13 × 10¹² vg/kg AAV-FIB）. A CHD blood stasis rat model was established using a high-fat diet combined with vitamin D₃ and isoproterenol， and the corresponding interventions were administered via tail vein injection on day 0 and 3 of high-fat feeding. Hematoxylin-eosin （HE） staining was used to assess the pathological morphology of the aorta， and lipid levels， blood rheology， and levels of Fib， endothelin-1 （ET-1）， superoxide dismutase （SOD）， and malondialdehyde （MDA） were measured using ELISA. Western blot analysis was used to detect the expression of Nrf2 and HO-1 proteins， and immunofluorescence staining was used to observe protein localization.

Results

①Compared with the N and HFD groups， the Fib expression level increased in the HFD+FIB High group （

0.05）. ②Compared with the N group， the Fib expression level increased in the CHDX group （

0.01）， total cholesterol （TC） and low density lipoprotein cholesterol （LDL-C） levels， and plasma low-viscosity increased （

0.05）， obvious lesions were observed in the aorta. ST segment elevation was seen on the electrocardiogram. The MDA and ET-1

levels increased （

0.01）， SOD level decreased （

0.01）， and the protein expression levels of Nrf2 and HO-1 in the aorta increased （

0.01）. Compared with the CHDX group， the CHDX+FIB group showed further increased Fib expression （

0.05）， and the TC， triglycerides （TG）， and LDL-C levels were significantly increased （

0.05）， the high density lipoprotein cholesterol （HDL-C） level was decreased （

0.01）， plasma viscosity was increased （

0.05）， atherosclerotic plaques formed in the aorta， ECG ST-segment elevation was

0.1 mV， MDA and ET-1 levels decreased （

0.01）， while SOD， Nrf2， and HO-1 levels increased （

0.01）.

Conclusions

A rat model of Fib overexpression can be successfully established via a high-fat diet. Fib overexpression increases the blood lipid level and plasma viscosity in rats， thereby enhancing the pathogenicity of CHD with blood stasis syndrome. Concurrently， it activates the Nrf2/HO-1 signaling pathway to initiate compensatory mechanism， regulating excessive vascular damage caused by oxidative stress.

关键词

Keywords

references

刘明波，何新叶，杨晓红，等 . 《中国心血管健康与疾病报告2023》概要（心血管疾病流行及介入诊疗状况）［J］. 中国介入心脏病学杂志， 2024 ， 32 （ 10 ）： 541 - 550 .

金娟，郭东浩，孔菲 . 国医大师段富津运用“三参丹饮”治疗气虚血瘀型胸痹经验撷要［J］. 辽宁中医药大学学报， 2019 ， 21 （ 12 ）： 84 - 87 .

BENDERLY M ， GRAFF E ， REICHER-REISS H ， et al . Fibrinogen is a predictor of mortality in coronary heart disease patients ［J］. Arterioscler Thromb Vasc Biol ， 1996 ， 16 （ 3 ）： 351 - 356 .

MJELVA Ø R ， SVINGEN G F T ， PEDERSEN E K R ， et al . Fibrinogen and neopterin is associated with future myocardial infarction and total mortality in patients with stable coronary artery disease ［J］. Thromb Haemost ， 2018 ， 118 （ 4 ）： 778 - 790 .

中国医师协会中西医结合医师分会 . 活心丸（浓缩丸）临床应用专家共识［J］. 中国中西医结合杂志， 2025 ， 45 （ 2 ）： 140 - 145 .

牛朴钰，刘耀远，王含香，等 . 207 793例冠心病中医证候分布特点研究［J］. 中国中医药现代远程教育， 2021 ， 19 （ 14 ）： 201 - 204 .

DEVECI B ， GAZI E . Relation between globulin， fibrinogen， and albumin with the presence and severity of coronary artery disease ［J］. Angiology ， 2021 ， 72 （ 2 ）： 174 - 180 .

STAKHNEVA E M ， MESHCHERYAKOVA I A ， DEMIDOV E A ， et al . A proteomic study of atherosclerotic plaques in men with coronary atherosclerosis ［J］. Diagnostics ， 2019 ， 9 （ 4 ）： 177 .

WANG J ， JIA L ， LI X ， et al . New insights into the association between fibrinogen and coronary atherosclerotic plaque vulnerability： an intravascular optical coherence tomography study ［J］. Cardiovasc Ther ， 2019 ， 2019 ： 8563717 .

WU F ， CHIPMAN A ， DONG J F ， et al . Fibrinogen activates PAK1/Cofilin signaling pathway to protect endothelial barrier integrity ［J］. Shock ， 2021 ， 55 （ 5 ）： 660 - 665 .

TOMITA T ， KATO M ， HIRATSUKA S . Regulation of vascular permeability in cancer metastasis ［J］. Cancer Sci ， 2021 ， 112 （ 8 ）： 2966 - 2974 .

JINNOUCHI H ， GUO L ， SAKAMOTO A ， et al . Diversity of macrophage phenotypes and responses in atherosclerosis ［J］. Cell Mol Life Sci ， 2020 ， 77 （ 10 ）： 1919 - 1932 .

HOSSEINI E ， GHASEMZADEH M ， AZIZVAKILI E ， et al . Platelet spreading on fibrinogen matrix， a reliable and sensitive marker of platelet functional activity during storage ［J］. J Thromb Thrombolysis ， 2019 ， 48 （ 3 ）： 430 - 438 .

杨莹骊，王亚红，孙卉丽，等 . 冠心病血瘀证与冠脉病变相关性研究进展［J］. 上海中医药杂志， 2015 ， 49 （ 2 ）： 90 - 93 .

GARCIA-MEJIA K A ， CUSTODIO-CHABLE S J ， VAZQUEZ-FRANCO J E ， et al . β-amyloid orchestrates factor Ⅻ and platelet activation leading to endothelial dysfunction and abnormal fibrinolysis in alzheimer disease ［J］. Alzheimer Dis Assoc Disord ， 2021 ， 35 （ 1 ）： 91 - 97 .

ROSS R . The pathogenesis of atherosclerosis： a perspective for the 1990s ［J］. Nature ， 1993 ， 362 （ 6423 ）： 801 - 809 .

GUO J ， DU L . An update on ox-LDL-inducing vascular smooth muscle cell-derived foam cells in atherosclerosis ［J］. Front Cell Dev Biol ， 2024 ， 12 ： 1481505 .

GIANOPOULOS I ， DASKALOPOULOU S S . Macrophage profiling in atherosclerosis： understanding the unstable plaque ［J］. Basic Res Cardiol ， 2024 ， 119 （ 1 ）： 35 - 56 .

ZHENG D ， LIU J ， PIAO H ， et al . ROS-triggered endothelial cell death mechanisms： Focus on pyroptosis， parthanatos， and ferroptosis ［J］. Front Immunol ， 2022 ， 13 ： 1039241 .

周曼丽，俞赟丰，罗晓欣，等 . 线粒体动力学介导冠心病血瘀证心肌能量代谢［J］. 中国实验方剂学杂志， 2021 ， 27 （ 21 ）： 80 - 90 .

LUYENDYK J P ， SCHOENECKER J G ， FLICK M J . The multifaceted role of fibrinogen in tissue injury and inflammation ［J］. Blood ， 2019 ， 133 （ 6 ）： 511 - 520 .

KRYCZKA K E ， KRUK M ， DEMKOW M ， et al . Fibrinogen and a triad of thrombosis， inflammation， and the renin-angiotensin system in premature coronary artery disease in women： a new insight into sex-related differences in the pathogenesis of the disease ［J］. Biomolecules ， 2021 ， 11 （ 7 ）： 1036 .

KONIECZYNSKA M ， NATORSKA J ， UNDAS A . Thrombosis and aging： fibrin clot properties and oxidative stress ［J］. Antioxid Redox Signal ， 2024 ， 41 （ 4-6 ）： 233 - 254 .

LARSEN J B ， HVAS A M . Fibrin clot properties in coronary artery disease： new determinants and prognostic markers ［J］. Pol Arch Intern Med ， 2021 ， 131 （ 11 ）： 16113 .

SURMA S ， BANACH M . Fibrinogen and atherosclerotic cardiovascular diseases-review of the literature and clinical studies ［J］. Int J Mol Sci ， 2021 ， 23 （ 1 ）： 193 .

ZABCZYK M ， NATORSKA J ， UNDAS A . Fibrin clot properties in atherosclerotic vascular disease： From pathophysiology to clinical outcomes ［J］. J Clin Med ， 2021 ， 10 （ 13 ）： 2999 .

KIM M H ， LEE J ， JUNG S ， et al . The involvement of ginseng berry extract in blood flow via regulation of blood coagulation in rats fed a high-fat diet ［J］. J Ginseng Res ， 2017 ， 41 （ 2 ）： 120 - 126 .

程扣辉，姜允奇，王文景，等 . 非受体酪氨酸激酶Src在异丙肾上腺素介导脂肪分解中的作用［J］. 中国心血管杂志， 2021 ， 26 （ 6 ）： 569 - 574 .

周红，吴晓燕，袁艺标，等 . 三种剂量维生素D 3 结合高脂饲料建立大鼠动脉粥样硬化模型的比较［J］. 中国动脉硬化杂志， 2012 ， 20 （ 11 ）： 995 - 998 .

ZHEN E Y ， CHEN Y Q ， RUSSELL A M ， et al . Angiopoietin-like protein 4/8 complex-mediated plasmin generation leads to cleavage of the complex and restoration of LPL activity ［J］. Proc Natl Acad Sci U S A ， 2023 ， 120 （ 7 ）： e2214081120 .

XIAO S T ， KUANG C Y . Endothelial progenitor cells and coronary artery disease： Current concepts and future research directions ［J］. World J Clin Cases ， 2021 ， 9 （ 30 ）： 8953 - 8966 .

YAN R ， ZHANG X ， XU W ， et al . ROS-induced endothelial dysfunction in the pathogenesis of atherosclerosis ［J］. Aging Dis ， 2024 ， 16 （ 1 ）： 250 - 268 .

吴以岭 . “脉络-血管系统”相关性探讨［J］. 中医杂志， 2007 ， 48 （ 1 ）： 5 - 8 .

SHI L ， LI Y ， XU X ， et al . Brown adipose tissue-derived Nrg4 alleviates endothelial inflammation and atherosclerosis in male mice ［J］. Nat Metab ， 2022 ， 4 （ 11 ）： 1573 - 1590 .

SRI ISWARI R ， DAFIP M ， PURWANTOYO E . Malondialdehyde （MDA） production in atherosclerosis supplemented with steamed tomato ［J］. Pak J Biol Sci ， 2021 ， 24 （ 3 ）： 319 - 325 .

WANG L ， CHENG C K ， YI M ， et al . Targeting endothelial dysfunction and inflammation ［J］. J Mol Cell Cardiol ， 2022 ， 168 ： 58 - 67 .

HLOCH O ， FILA L ， HAVLIN J ， et al . Significance of plasma fibrinogen and malondialdehyde in the post-inflammatory period in patients with cystic fibrosis ［J］. Bratisl Lek Listy ， 2022 ， 123 （ 3 ）： 149 - 152 .

SHAITO A ， ARAMOUNI K ， ASSAF R ， et al . Oxidative stress-induced endothelial dysfunction in cardiovascular diseases ［J］. Front Biosci ， 2022 ， 27 （ 3 ）： 105 .

SCRIBANO MDE L ， BAEZ MDEL C ， FLORENCIA B ， et al . Effects of atorvastatin on oxidative stress biomarkers and mitochondrial morphofunctionality in hyperfibrinogenemia-induced atherogenesis ［J］. Adv Med ， 2014 ， 2014 ： 947258 .

ZHANG Q ， LIU J ， DUAN H ， et al . Activation of Nrf2/HO-1 signaling： An important molecular mechanism of herbal medicine in the treatment of atherosclerosis via the protection of vascular endothelial cells from oxidative stress ［J］. J Adv Res ， 2021 ， 34 ： 43 - 63 .

SHA W ， ZHAO B ， WEI H ， et al . Astragalus polysaccharide ameliorates vascular endothelial dysfunction by stimulating macrophage M2 polarization via potentiating Nrf2/HO-1 signaling pathway ［J］. Phytomedicine ， 2023 ， 112 ： 154667 .

CHEN Y ， ZHANG X ， YANG Y ， et al . Tert-butylhydroquinone enhanced angiogenesis and astrocyte activation by activating nuclear factor-E2-related factor 2/heme oxygenase-1 after focal cerebral ischemia in mice ［J］. Microvasc Res ， 2019 ， 126 ： 103891 .

YU W ， LIU W ， XIE D ， et al . High level of uric acid promotes atherosclerosis by targeting NRF2-mediated autophagy dysfunction and ferroptosis ［J］. Oxid Med Cell Longev ， 2022 ， 2022 ： 9304383 .

于春磊，徐天娇，张晓杰，等 . 基于“有故无殒”莪术对正常和血瘀证小鼠毒性差异机制的研究［J］. 药学学报， 2019 ， 54 （ 2 ）： 329 - 334 .

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