四逆散对缺血性卒中后抑郁小鼠抑郁样行为的作用及其对SIRT3/SOD2通路的影响

都丹阳; 侯芳琴; 李海波

doi:10.16305/j.1007-1334.2025.z20250303004

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四逆散对缺血性卒中后抑郁小鼠抑郁样行为的作用及其对SIRT3/SOD2通路的影响

创新中药与经典名方专栏 | 更新时间：2025-09-02

- 四逆散对缺血性卒中后抑郁小鼠抑郁样行为的作用及其对SIRT3/SOD2通路的影响
- Effects of Sini San on depressive‑like behaviors in mice with post‑ischemic stroke depression and its influence on SIRT3/SOD2 signaling pathway
- 上海中医药杂志 2025年59卷第9期页码：15-22
- 作者机构：
  
  1.辽宁中医药大学第一临床学院（辽宁沈阳 110847）
  2.遵义医科大学药学院（贵州遵义 563000）
  3.辽宁中医药大学中医学院（辽宁沈阳 110847）
- 作者简介：
  
  都丹阳，女，硕士研究生，主要从事心脑血管疾病的基础及临床研究
  李海波，教授，博士研究生导师； E-mail：735658485@qq.com
- 基金信息：
  
  辽宁省科学技术计划项目(2022JH2/101300058)
- DOI：10.16305/j.1007-1334.2025.z20250303004
  中图分类号：
- 收稿日期：2025-03-03，
  
  纸质出版日期：2025-09-10
- 稿件说明：
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都丹阳,侯芳琴,李海波.四逆散对缺血性卒中后抑郁小鼠抑郁样行为的作用及其对SIRT3/SOD2通路的影响[J].上海中医药杂志,2025,59(9):15-22.

DU Danyang,HOU Fangqin,LI Haibo.Effects of Sini San on depressive‑like behaviors in mice with post‑ischemic stroke depression and its influence on SIRT3/SOD2 signaling pathway[J].Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine,2025,59(9):15-22.
都丹阳,侯芳琴,李海波.四逆散对缺血性卒中后抑郁小鼠抑郁样行为的作用及其对SIRT3/SOD2通路的影响[J].上海中医药杂志,2025,59(9):15-22. DOI： 10.16305/j.1007-1334.2025.z20250303004.

DU Danyang,HOU Fangqin,LI Haibo.Effects of Sini San on depressive‑like behaviors in mice with post‑ischemic stroke depression and its influence on SIRT3/SOD2 signaling pathway[J].Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine,2025,59(9):15-22. DOI： 10.16305/j.1007-1334.2025.z20250303004.

摘要

目的

研究四逆散对缺血性卒中后抑郁（PSD）小鼠抑郁样行为的作用及可能的机制。

方法

通过大脑中动脉栓塞（MCAO）联合慢性不可预知温和应激（CUMS）构建PSD小鼠模型。完成建模后，将75只符合标准的雄性C57BL/6J小鼠随机分配至PSD相关组：PSD组、PSD+四逆散低剂量组、PSD+四逆散中剂量组、PSD+四逆散高剂量组、PSD+氟西汀组，每组15只。另选取30只仅接受麻醉及血管分离操作（未行MCAO和CUMS）的雄性C57BL/6J小鼠，随机分为假手术组和假手术+四逆散高剂量组，每组15只。给药组小鼠分别灌胃氟西汀或四逆散（4.9 g/kg、9.8 g/kg和19.6 g/kg），假手术组和假手术+四逆散高剂量组分别灌胃0.9%氯化钠溶液和四逆散（19.6 g/kg），连续28 d。评估小鼠抑郁样行为，用酶联免疫吸附分析（ELISA）法检测大脑内侧前额叶皮质（mPFC）中5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平，基于酶偶联比色法测定腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）活性，通过分光光度法确定烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP

＋

）与还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）比值，观察线粒体超微结构，Western blot法检测沉默信息调控因子3（SIRT3）、超氧化物歧化酶2（SOD2）和凋亡相关蛋白表达。

结果

PSD组小鼠体质量降低，蔗糖偏好率降低，悬尾不动时间延长，显示抑郁样行为。四逆散干预后，小鼠体质量增加，蔗糖偏好率升高，悬尾不动时间缩短，抑郁样行为改善。PSD小鼠mPFC中ROS和MDA水平增加，SOD活力、ATP和NADP

＋

/NADPH比值降低，四逆散能逆转这些变化。PSD小鼠mPFC中SIRT3和SOD2蛋白表达减少，Bcl-2相关X蛋白/ B淋巴细胞瘤-2（Bax/Bcl-2）比值和剪切型胱天蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）蛋白水平增加，四逆散能逆转这些蛋白变化，表明四逆散可能通过调节线粒体功能和抗氧化途径改善PSD小鼠的抑郁样行为。

结论

四逆散具有明显改善PSD小鼠抑郁样行为的作用，其机制与调控SIRT3/SOD2信号通路抑制线粒体氧化应激，进而抑制细胞凋亡有关。

Abstract

Objective

To investigate the effect of Sini San （SNS） on depressive-like behaviors and its potential mechanism of action in mice with post-stroke depression （PSD） following ischemic stroke.

Methods

A PSD mouse model was established by combining middle cerebral artery occlusion （MCAO） with chronic unpredictable mild stress （CUMS）. After successful modeling， 75 eligible male C57BL/6J mice were randomly assigned to PSD-related groups： PSD group， PSD+SNS low-dose group （4.9 g/kg）， PSD+SNS medium-dose group （9.8 g/kg）， PSD+SNS high-dose group （19.6 g/kg）， and PSD+Fluoxetine group （

=15 per group）. An additional 30 male C57BL/6J mice undergoing anesthesia and vascular dissection only （without MCAO or CUMS） were randomly divided into a sham surgery group and a sham surgery+SNS high-dose （19.6 g/kg） group （

=15 per group）. Treatment groups received daily gavage of fluoxetine or SNS （4.9， 9.8， or 19.6 g/kg） for 28 consecutive days. The sham surgery group and sham surgery+SNS high-dose group received 0.9% saline and SNS （19.6 g/kg） via gavage， respectively， for 28 days. Depressive-like behaviors were assessed. Levels of serotonin （5-HT）， norepinephrine （NE）， reactive oxygen species （ROS）， malondialdehyde （MDA）， and superoxide dismutase （SOD） in the medial prefrontal cortex （mPFC） were measured using enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. Adenosine triphosphate （ATP） activity was determined using an enzyme-coupled colorimetric assay. The ratio of nicotinamide adenine dinucleotide phosphate （NADP

） to reduced NADP

（NADPH） was measured spectrophotometrically. Mitochondrial ultrastructure was observed. Protein expression of sirtuin 3 （SIRT3）， superoxide dismutase 2 （SOD2）， and apoptosis-related proteins （Bax， Bcl-2， cleaved Caspase-3） was detected by Western blot analysis.

Results

Mice in the PSD group exhibited decreased body weight， reduced sucrose preference rate， and prolonged immobility time in the tail suspension test， indicating depressive-like behavio

rs. SNS intervention increased body weight， elevated sucrose preference rate， shortened tail suspension immobility time， and ameliorated these depressive-like behaviors. PSD mice showed increased ROS and MDA levels， and decreased SOD activity， ATP levels， and NADP

/NADPH ratio in the mPFC； SNS reversed these changes. Reduced protein expression of SIRT3 and SOD2， increased Bax/Bcl-2 ratio and cleaved Caspase-3 levels were observed in the mPFC of PSD mice； SNS reversed these protein alterations. This suggests SNS may improve depressive-like behaviors in PSD mice by regulating mitochondrial function and antioxidant pathways.

Conclusions

SNS exerts significant antidepressant effects on depressive-like behaviors in PSD mice. Its mechanism is associated with the modulation of the SIRT3/SOD2 signaling pathway， suppressing mitochondrial oxidative stress and thereby inhibiting neuronal apoptosis.

关键词

Keywords

references

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